产品介绍

Protonex™ Red 670 AM是Protonex™ Red 670的细胞膜通透性衍生物，其荧光强度会随环境pH值变化而动态改变：在碱性条件下荧光信号极弱，而在酸性环境中荧光强度达到最大值。当该染料与细胞内酸性靶标（如溶酶体等）结合后，可在632 nm氦氖或647 nm红色激光激发下发出强烈的红色荧光，通过监测其荧光强度变化，研究人员能够实现对活细胞内酸性靶标的特异性标记和动态追踪。

实验方案

储存液配制

所有未使用的储存液均应分装为单次使用量，于-20°C避光保存，避免反复冻融。

Protonex™ Red 670 AM储存液

使用优质无水DMSO配制10-20 mM储存液。

注：未使用的储存液需分装后≤-20°C避光保存，避免反复冻融。 

工作液配制

Protonex™ Red 670 AM工作液

实验当日将染料溶解于DMSO或解冻储存液至室温，用缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）配制5-20 μM工作液。

注意：1.可添加0.02% Pluronic® F-127增强AM酯水溶性

           2.含有机阴离子转运体的细胞建议添加1-4 mM丙磺舒（终浓度0.5-2 mM）防止染料外排 

标准实验方案

重要说明：本方案为哺乳动物活细胞染色参考流程，需根据实际需求优化。

1.接种细胞（如96孔板100 µL/孔或384孔板25 µL/孔）

2.次日加入等体积Protonex™ Red 670 AM工作液（96孔板100 µL/孔，384孔板25 µL/孔）

3.37°C细胞培养箱孵育30-60分钟

4.用HHBS或选定缓冲液洗去多余染料

5.采用HHBS缓冲液或自选缓冲体系配制化合物板

5.双模式检测可选：

a) 荧光显微镜检测：配备Cy5滤光片组

b) 酶标仪检测：参数设为Ex/Em = 640/680 nm（截止值665 nm）